SDS-PAGE凝胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳,即聚丙烯酰胺凝胶电泳,是生物化学和(hé )分子生物学实验中常用(yòng )的蛋白质分离(⭕)(lí )和鉴(🤰)定技术(shù ),这项技(jì )术的基本原(yuán )理是利用蛋白质(zhì )在(zài )电(diàn )场中的迁移率与其分子量成(⛹)反比的关系(xì ),通过(🗞)添(tiān )加阴离(😈)子洗涤剂(jì )SDS(十(shí )二烷基硫(liú )酸(suān )钠)使蛋白质带(dài )上负电荷,从而消(🦀)除(👲)了蛋白质原有的电(✨)荷差异,使得蛋白质的(de )迁移仅受其大小的影响。
操作步骤方面,首先需要制备适当浓(🌋)度和pH值的聚丙(bǐng )烯酰(🍺)胺凝胶(🛸),然后将含有SDS和还(hái )原剂的(de )蛋(dàn )白质样品加入凝胶孔中,通电后,蛋白质开始根据(jù )大(dà )小分离,小分子蛋白质(🛢)移(yí )动得更快,而大分子(🤢)蛋白质则(💿)较慢,通过染(🚒)色或西方(fāng )印迹等方法可以检测和(hé )分析蛋白质(🍱)。
应用(yòng )范围广泛,SDS-PAGE不仅用于(yú )蛋白质分子量的测定,还广泛应用于蛋白质纯化(huà )程(chéng )度(dù )的分析、蛋(🍧)白质变性和复性研究以及蛋白质-蛋白质相互作用的研究,它(🍧)也是研究蛋白质翻译后修饰的重要工具。
尽管SDS-PAGE是一种强大的分(fèn )析工(🍷)具,但它(tā )也有局限性,对于(🔂)极(jí )端(🦎)大小的蛋白质,分辨率可能会(huì )降(✒)(jiàng )低;某些蛋白质可能因为结构的(de )特殊性而在凝胶中的迁移(🔨)不符合预期,在进行SDS-PAGE分(🚴)析时,通(tōng )常需要结(jié )合其他生化和分子生(🥃)物学技术以获得更准(zhǔn )确的结果。
视频本站于2024-10-17 10:10:59收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。