SDS-PAGE凝胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳,即聚丙烯(👲)酰胺凝胶电(diàn )泳,是生物化学和分子生(shēng )物(wù )学(🚍)实验中常用的蛋白质分(🕧)(fèn )离和鉴定技术,这项技术的基本(běn )原理(lǐ )是利用蛋白质在电场中的迁移率(lǜ )与其分子量成(chéng )反比的关系,通(tōng )过添加(🤴)阴离子洗涤(🈲)剂SDS(十(shí )二烷基硫酸钠)使蛋白(🛏)质带上负电荷,从而消除了蛋白质原有的电荷差异(yì ),使得蛋白质的(🚶)迁(qiān )移仅受其大小的影响。
操作步骤(📘)方面,首先需要制备适当浓度和pH值(📴)的聚丙烯酰胺(àn )凝胶,然(rá(😞)n )后将(🅱)含有(💹)(yǒu )SDS和还原剂(jì )的蛋白质样(yàng )品加入凝胶孔中,通电后,蛋白质开始根(gēn )据大(dà )小(🔠)分离,小分子蛋白(bái )质移动得(🏝)更快,而(🎵)大分子蛋白质则较慢,通过染色(sè )或西方印迹等(😱)方法可以检(🎟)测和(hé )分析蛋白质。
应用范围广泛,SDS-PAGE不仅(jǐn )用于蛋白质分子量的测定,还(hái )广泛应用于蛋白(bái )质纯化(huà )程度(dù )的(🔯)分析、蛋白质(🖍)变性和复性研究(jiū )以及蛋白质-蛋白(bái )质相互作用的研究,它也是研究蛋(🥍)白质翻译后修饰的重(chó(🏰)ng )要工(gōng )具(jù )。
尽(jìn )管SDS-PAGE是一(yī )种强大(dà )的分析工具,但它也有局限(xiàn )性,对于极端大小的蛋白(🥍)质,分辨率可能会降低;(🚞)某些蛋(🤘)(dàn )白质可能因为结构的特殊性而在(zài )凝(níng )胶中(zhōng )的迁移(🔐)不符合预期,在进行SDS-PAGE分析时,通常需要结合其他生化和分子生物学技术以获得更准确的结果(📂)。
视频本站于2024-10-19 05:10:27收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。