SDS-PAGE凝胶(⚪)电泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳(yǒ(⏲)ng ),即(jí )聚丙烯酰胺凝(🛳)胶电泳,是生物化学和分子生(shēng )物学实验中(zhōng )常用的蛋白质分离和(🥦)鉴定技(jì )术,这项技术的基本原(🎉)理是利用蛋白质在电场中的迁移率与(yǔ )其分子量成反比的关系,通过(guò )添加阴离子洗涤剂SDS(十二烷(wán )基(jī )硫酸钠)使(shǐ )蛋白(bái )质带上负电荷,从(cóng )而(ér )消除了蛋白质原有的电荷(hé )差(chà )异(📧),使得(dé )蛋白质的迁移仅受其大小的影响(xiǎng )。
操作步(🤯)(bù )骤(zhò(😘)u )方面,首先需要制备适当浓度和pH值的聚(jù )丙烯酰胺凝胶,然后(🥐)将含有SDS和还原剂的蛋(📏)白质样品加入凝胶孔(🀄)中,通电后,蛋白质开始根据大小(xiǎo )分离,小(🏋)分子蛋白质(❗)移动得更快,而(ér )大分子(⛸)蛋白质则较慢,通过染色或西方印迹等方法可以检测和(🏋)分(fèn )析蛋白质。
应用范(🥡)围广泛,SDS-PAGE不(🔡)仅用于蛋(dàn )白质分子量的测(cè )定,还广泛应用于蛋白质纯化程度的分析(xī )、蛋白(bái )质变性和复性研究以及蛋白质-蛋白质相互作用的研究(📏),它(🏸)也是研究蛋(➗)白质翻译后修(xiū )饰的重要工具。
尽(jìn )管SDS-PAGE是一种(zhǒng )强(qiáng )大的分析(xī )工具,但它(tā )也有局限性(🔶),对于(🅱)极(jí )端(duān )大小的蛋白质,分辨率可能会降低;(🕵)某些蛋白(🚱)(bái )质可能因为(wéi )结构的特殊性而在(⚓)凝胶中的迁移不符合预期,在进行SDS-PAGE分析时,通常(cháng )需要结合其他生化和分子生物学技术以获得(dé )更准确的结果。
视频本站于2024-10-17 09:10:03收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。