SDS-PAGE凝胶(🌆)电泳技(jì )术
SDS-PAGE凝胶电泳,即聚丙烯酰(xiān )胺凝胶电泳,是生物化学(xué )和分子生物学实验中常(cháng )用(👂)的蛋(😶)白质分离和鉴(🐂)定技术,这项技术的基本(běn )原理是利用蛋白(bái )质在电场中(🕝)的迁移率与其分子量成反比的关系,通过(guò )添加阴离(lí )子(zǐ(💚) )洗涤剂SDS(十二(è(💚)r )烷基硫(liú )酸钠)使(📩)蛋白质带上(shàng )负电荷,从(🔍)(cóng )而消(xiāo )除了蛋(💽)白质原有的电荷差异,使得蛋(dàn )白质的迁移仅受其大小的影响。
操作步骤方面,首先(xiān )需要(yào )制备适当(💦)浓度(🍆)和pH值的聚丙烯酰胺凝胶,然后将含有SDS和还原剂的蛋白质样品加入凝胶孔中,通电后(hòu ),蛋(dàn )白质开始根(gēn )据大小分离,小分子蛋白质移动得(dé )更快,而(👤)大分子蛋白质则较(jiào )慢,通过染色(🤽)或(🕦)西方印迹等方法可以检测和分析蛋白质。
应用范围(👟)(wéi )广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋白质(zhì )分子量的测定,还(🎉)广泛应用(yòng )于蛋白质纯(chún )化程度的(💷)分析、蛋白质变性(✔)和复性研究(jiū )以及蛋白质-蛋白质相互作用的(de )研究,它也是研究(jiū )蛋白质翻译后修(xiū )饰的(de )重要工具。
尽管SDS-PAGE是一(yī )种(zhǒng )强大(dà )的分析工具,但它也有局限性,对于极端大小的蛋白质,分(fèn )辨(😹)率可能会降(jiàng )低;某些蛋白质可能因为结构的特殊性(xìng )而在(zài )凝胶中的迁移(👪)不符合预期(qī ),在进行SDS-PAGE分析时(shí ),通常需(xū )要结合其(🎄)他生化和分子生物学技术以获得更准确的结果。
视频本站于2024-10-27 12:10:14收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。