SDS-PAGE凝胶电泳技术
SDS-PAGE凝(🌺)胶电泳,即聚(jù )丙烯(♐)酰(xiān )胺凝胶电泳,是生物化学和分(fèn )子(zǐ )生物学实验中常用的蛋白(bái )质分离和鉴定技术,这项技术的基本原理是利用蛋白(📅)质在(🤺)电场中的迁(qiān )移率与(yǔ )其分子量成反比的关系,通过添加阴离子洗涤剂SDS(十二烷基硫(liú )酸钠)使蛋白质带上负电荷(hé ),从而(📖)(ér )消除(🚄)了(le )蛋(dàn )白质原有的电荷差异,使(🐛)(shǐ )得蛋白质的迁移仅(🔎)受其大小的影响。
操作步(👾)骤方(fāng )面,首(shǒu )先需要制备适当浓度(dù )和(🥦)pH值的聚丙烯酰胺凝胶,然后将含有SDS和还原剂的蛋白质样品(🖨)(pǐn )加入凝胶孔中,通电后,蛋白质开(kāi )始根据大小分离,小分(fèn )子蛋(🏋)白质移(yí )动得更快,而大分子(zǐ )蛋白质则较慢,通过染色或(huò )西(xī )方印迹等方法可以检测和(hé )分析蛋白质(zhì )。
应(🥨)用范围广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋白质分子量的测定,还广泛(fàn )应(yīng )用于(yú(🔥) )蛋(dàn )白质纯化程度的分析、蛋白质变性和复性研究以及蛋(🏮)(dàn )白质-蛋白质相互作用的(de )研究,它也是研究蛋(dàn )白质翻译后修饰的重要工具。
尽管SDS-PAGE是一种强大的分析工具,但它也有(yǒu )局限性,对于极端大小(xiǎo )的蛋白质,分辨率可能会降低(dī );某些蛋白质可能(néng )因(yīn )为(📅)结构(🍜)的特殊(🤔)性而在凝(níng )胶中的迁移不(bú )符合预期,在进行(háng )SDS-PAGE分析(xī )时,通常需要结合其他生化和(🌽)分子(📐)生物学技术(shù )以获(huò )得更(🌷)准确的结果。
视频本站于2024-10-17 06:10:06收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。