SDS-PAGE凝(níng )胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳,即(👥)聚丙烯酰(🥢)胺凝胶电泳,是生物化学和分子生(shēng )物学实验中常用的蛋(🚓)白(bái )质分离和(hé )鉴定技术,这项(❌)技术(🌌)的基本原理是利用蛋白质在(zài )电场中的迁移率与其分(👆)子量成反比的关系,通过添加阴离子洗涤剂SDS(十(shí )二(🔎)烷基硫酸钠)使蛋白质带上(shàng )负电荷(hé ),从而消除了蛋白质原(yuán )有的电荷差(chà )异,使得蛋白质的迁移仅受(💨)其(qí )大小的影响。
操作(🎤)(zuò )步骤方(fāng )面(miàn ),首(🥡)先(xiān )需要(🦉)制备适当浓度和pH值的聚丙烯酰胺凝胶,然后将(jiāng )含有SDS和还原剂的蛋白质样(📊)品加入凝胶孔中,通电(🉑)后,蛋白(bái )质(zhì )开(👑)始根据大小分离,小分子蛋白质移动得更(gèng )快,而大分子蛋白质(📨)则较慢,通过染色或西方印迹等方法(fǎ )可以检(jiǎn )测和分析蛋白质。
应用范围广泛,SDS-PAGE不(bú )仅用于蛋白质分子量的测定(🤢),还广泛应(yīng )用于蛋白质纯化程(chéng )度的(de )分(fèn )析、蛋白质变性(xìng )和复性研(yán )究以及蛋白(bái )质-蛋白(bái )质(🍞)相互作用的研究(jiū ),它也是研究蛋白质翻译后修饰的重要工具。
尽管SDS-PAGE是一种强(🕺)大的分析工具,但(🎢)它也有局限性,对于极端大小的蛋白质,分辨率可能会降(jiàng )低;某些蛋白质可(😋)(kě )能因为结构的特殊性而在凝(níng )胶中的迁移不符合(🌐)(hé )预期(qī ),在进行SDS-PAGE分析时,通(🔷)常需(xū )要结合其他生化和分子生(shēng )物学技术(🗺)(shù(👧) )以获得更准确的结果。
视频本站于2024-10-19 11:10:22收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。