SDS-PAGE凝胶(jiāo )电泳技术(shù )
SDS-PAGE凝胶电泳,即聚丙烯酰胺凝(🚩)胶电泳,是生物化学(xué )和分子生(🥧)物学实验中常用的蛋(dàn )白(🕊)质(zhì )分离和鉴定技(jì )术,这项技(🚃)术的基(jī )本原(yuán )理是(📇)利用蛋白质在电场中的迁移率与其分子量成反(fǎn )比的关系,通过添加(jiā )阴离子洗涤剂SDS(十二烷基硫(liú )酸钠)使蛋白质带上负电(🧘)(diàn )荷,从而消除了蛋白质原有的电荷差异,使得蛋白(💞)质的迁移仅受其大小的影响。
操作步(bù )骤方面,首先(🌘)(xiān )需(xū )要制(🗿)备适当(dāng )浓度(📔)和pH值的聚丙(bǐng )烯(🐦)酰胺凝胶,然后将含有SDS和(⬆)还原剂的蛋白质(zhì )样品加入凝胶孔中,通电后,蛋白质(🍉)开始根据大小分离,小分子(🏮)蛋白(🍒)质移(yí )动得更快,而大分子蛋(dàn )白质(zhì )则较慢,通过染色(sè )或西方印迹等方法可以检测和(hé )分析蛋白质。
应用范围广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋(dàn )白(bái )质分子量的测定(🤣),还广泛应用于蛋白质纯化程度的分析、蛋(dàn )白质(🤵)变(biàn )性和复性研究以及蛋白质-蛋白质相互作用的研究,它也是研究蛋白(bái )质(🖋)翻译后修饰的重要工具。
尽管(guǎn )SDS-PAGE是(shì )一种强大的分析工具,但它也有局限性,对于极(jí )端大小(xiǎo )的蛋白质(zhì ),分辨率可能会降(jiàng )低;某些蛋(🆘)白质可能(néng )因为结构的特殊性(xìng )而(🍦)(ér )在凝(níng )胶(jiāo )中的迁(🛐)(qiān )移不符合预期,在(zài )进行(háng )SDS-PAGE分析时,通常需(📔)要结合其他生化和分子生物学技术以获得更准确的结果。
视频本站于2024-10-22 11:10:18收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。