SDS-PAGE凝胶电泳技术
SDS-PAGE凝胶电泳(yǒng ),即聚丙(😹)烯酰胺凝胶电泳,是生(shē(🥤)ng )物化(🌡)学(🤧)和分子生物学实验中常用的蛋白质分离和鉴定技(⛺)术(shù ),这(🤫)(zhè )项技术(🎳)的(de )基本原(yuán )理是利用蛋白质在电场中的迁移(yí )率与(yǔ )其(🔮)分子(zǐ )量成反比的关系,通过添(tiān )加阴离子洗涤剂(🧖)SDS((🔼)十二烷基硫酸(🏷)钠)使蛋白质带上负电荷,从(cóng )而(ér )消(xiāo )除了蛋白质原有的电(🕛)荷差异,使得蛋白(bái )质的(de )迁移仅受其大小(xiǎo )的影响。
操作步骤方面,首先需要(yào )制备适(shì )当浓度(🕹)和pH值的聚丙烯酰胺凝胶,然后将含有SDS和还原剂的蛋白质样品(pǐn )加入凝(ní(🛤)ng )胶孔中,通电后,蛋白质开始根据大小分离,小分子蛋(dàn )白质移动(✉)得更快,而大分子蛋白(bái )质(zhì )则较慢,通过染色(sè )或西方印迹等(děng )方法可以检测和分析蛋白质。
应用范围广泛,SDS-PAGE不仅用于蛋白质分子量的测定,还(💹)广泛应(yīng )用于蛋白质纯化程度的分析、蛋白质变性和(hé )复性研(yá(🐍)n )究(jiū )以及蛋(dàn )白质-蛋白质相(xiàng )互作(zuò(🍨) )用的研究,它也是(shì )研(yán )究蛋白质翻译后(🚩)修饰(shì )的重要(🌫)(yào )工具。
尽管SDS-PAGE是(🌾)一种强(🚃)大的(de )分析工具,但它也(🛏)有局限性,对于极端大小的蛋白质,分(fèn )辨率可能会(huì )降低;某些蛋白(🦇)质可能因为结构的特殊性而在凝胶中的迁移不符合(hé )预期,在进行SDS-PAGE分析(xī )时,通常需要结合其他生(shēng )化和分子生物学技术以获得更准确的结果。
视频本站于2024-11-06 08:11:41收藏于/影片特辑。观看内地vip票房,反派角色合作好看特效故事中心展开制作。特别提醒如果您对影片有自己的看法请留言弹幕评论。